色譜圖其實簡單地講是一個橫坐標是時間縱坐標是電信號的二維圖譜。    

高效液相色譜法，你可以簡單地想象，固定相是一個多空海綿狀的柱形結(jié)構(gòu)，樣品在孔洞中進進出出。因為各個物質(zhì)的吸附能力不同，所以才會在色譜圖中拉開距離。
 

實驗相關(guān)的參數(shù)：

1、保留時間：也就是可以定性的數(shù)據(jù)參數(shù)

如果使用同樣的色譜柱，同樣的流動相，分析同樣的樣品，那么這個樣品的保留時間，應(yīng)該是固定的。不同保留時間的色譜峰，應(yīng)該表現(xiàn)出的是不同的物質(zhì)。如果你跑的是反相色譜，那么色譜峰越靠后，它對應(yīng)物質(zhì)的極性也就越小。

2、峰面積：也就是可以定量的數(shù)據(jù)參數(shù)

一旦分離，這些成分就被轉(zhuǎn)換成電離狀態(tài)。MS使用質(zhì)荷比作為鑒別組分的特征因子，因此下一步涉及在此基礎(chǔ)上分離組分。質(zhì)荷比對特定分子比HPLC中的保留時間更特異，這就是為什么使用MS。質(zhì)量電荷差異分析儀，就像HPLC中的分離技術(shù)一樣，可以有所不同，包括四極桿、飛行時間和離子阱等分析儀。然后由檢測器對出現(xiàn)的離子進行計數(shù)。產(chǎn)生的MS光譜顯示了質(zhì)荷比與峰值強度的關(guān)系。

色譜圖顯示組分作為保留時間和質(zhì)荷比與質(zhì)量相對豐度的函數(shù)，這意味著全LC-MS的總輸出是一個具有兩個水平軸的圖表。圖表的焦點可以根據(jù)研究人員的目標而改變。

峰值檢測在濾波之后進行，其中峰值表示成分或成分的斷裂。峰可以根據(jù)它們覆蓋的高度或面積來選擇。通過將存在的峰與已知的峰進行匹配，可以通過眼睛識別某些峰模式。這可以幫助確定存在什么分子，或者分子中存在多少原子。

在色譜圖中可以讀出來的參數(shù)，在同一個色譜條件下，同一個物質(zhì)的濃度和峰面積是成正比的。也就是說，如果你配制1.0mg/ml的X物質(zhì)，進樣后峰面積是10000，那么，你配制0.5mg/ml的X物質(zhì)，進樣后峰面積差不多就是5000

3、波長:這個是可以順利進行試驗的前提條件

同一樣品，同一方法，同一色譜柱，在不同波長的峰面積是不同的。一個物質(zhì)指在某些特殊波長下有吸收。比如一個物質(zhì)在210nm和254nm處有吸收。那么波長在280nm處可能無法檢出該物質(zhì)。所以一個實驗方法開始時要進行波長掃描。

頻譜濾波旨在去除數(shù)據(jù)中的噪聲，從而便于檢測感興趣的峰值。在LC - MS過程中，除了其他方法之外，還可以通過使用具有較小粒徑的較短柱來優(yōu)化降噪。

分析物的色譜圖不變，因此它通?？捎米鞣肿宇愋偷闹讣y。

這通常通過觀察保留時間和質(zhì)荷比的峰值在哪里來實現(xiàn)。目前，色譜圖的大多數(shù)分析都是通過計算完成的。這意味著軟件會將生成的色譜圖與已知的色譜圖進行比較，以識別成分，或者將其存儲為新發(fā)現(xiàn)的色譜圖。