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在發(fā)展中求生存,不斷完善,以良好信譽(yù)和科學(xué)的管理促進(jìn)企業(yè)迅速發(fā)展首頁-譜標(biāo)服務(wù)-三重四極桿質(zhì)譜是定量的不二之選
四級桿是很好的質(zhì)量分析儀器,三重四極桿質(zhì)譜作為高端產(chǎn)品,已經(jīng)大量進(jìn)入了我國商檢、質(zhì)檢和研究單位。毋庸置疑,三重四極桿是定量的不二之選,在定量方面有絕對優(yōu)勢。
質(zhì)譜分析具有高靈敏度,樣品用量少,高準(zhǔn)確度,分析速度快, 分離和鑒定同時(shí)進(jìn)行等優(yōu)點(diǎn)。常見的質(zhì)譜離子源E SI、A P C I、M A LD I。 常見質(zhì)譜分析儀器有四級桿分析器,飛行時(shí)間分析器 (TOF ),傅立葉轉(zhuǎn)換一離子回旋加速共振(F T-IC R )。
1、 三重四級桿也叫做QQQ質(zhì)譜
第一個(gè)四級桿根據(jù)設(shè)定的質(zhì)合比范圍掃描和選擇所需的離子;
第二個(gè)四級桿,也稱碰撞池,用于聚集和傳送離子。在選擇離子飛行的途中,引入碰撞氣體氮?dú)猓?/span>
第三個(gè)四級桿用于分析在碰撞池中產(chǎn)生的碎片離子。
簡單的說:Q1 可以篩選母離子 mz1;Q2 通過碰撞碎裂打碎離子,形成碎片離子峰;Q3 篩選子離子,定量子離子碎片強(qiáng)度 mz2。
實(shí)際上,碰撞池采用了六極桿的設(shè)計(jì),擁有更好的聚焦及傳輸功能,四級桿就被淘汰了,但還沿用三重四級桿的名稱。
2、每個(gè)四級桿分析器工作方式主要有三種 :
全離子通過 (TTI)、掃描 (SC A N )、選擇離子監(jiān)測(SIM )。
將兩個(gè)四級桿在空間上串聯(lián)起來,主要的工作方式有全掃描(Scan),選擇離子監(jiān)測(SIM ),子離子掃 描 (Product Ion Scan), 母離子掃 描 (Precur—sor Ion Scan), 多重反應(yīng)監(jiān)測 (M R M )。
3、三重四極桿工作模式
4、告訴你MRM 假陽性率較低的原因
MRM 假陽性率較低的原因:利用母離子和子離子的共同特征,定量選擇性提高。
例如:
– 如果樣品 A 母離子 697 和樣品 B542 在打碎后都具有子離子 245;
– 如果直接以特征離子 245 定量 A697 ,那么樣品 B 就會對樣品 A 的定量造成干擾;
– 而利用離子對 697-245 定量, B542 在 A697 通過 Q1 時(shí)無法通過 Q1 ,這樣就排除了B542 的干擾。
5、選擇性離子監(jiān)測與全掃描對比
在質(zhì)譜應(yīng)用領(lǐng)域里,三重四級桿質(zhì)譜是最靈敏和定量重現(xiàn)性最好的儀器,
使用三重四級桿質(zhì)譜儀有以下優(yōu)勢:
(1)樣品不需進(jìn)行衍生化;
(2)在單個(gè)分析中實(shí)現(xiàn)確認(rèn)定量;
(3)在復(fù)雜很臟的基體中的低檢測限,提高實(shí)驗(yàn)室效率、產(chǎn)出率;
(4)獲得更可靠和可值得信賴的測試結(jié)果。
舉個(gè)例子:三重四級桿檢測三聚氰胺
在三聚氰胺的LC/MS-MS檢測中,我們可以設(shè)定質(zhì)譜的Q1過濾出m/z127(三聚氰胺加氫峰,M+H+),Q2碎裂(CID)后產(chǎn)生的碎片:
三聚氰胺的加氫峰127在Q2中變?yōu)?10、85、68、60等m/z的碎片,即: 以分子量代表化學(xué)反應(yīng)物和產(chǎn)物:(127)=>(110)+(85)+(68)+(60)
Q2中包含4個(gè)反應(yīng)(Reaction): 1. (127)->(110) ;2. (127)->(85) ; 3. (127)->(68) ; 4. (127)->(60)。
我們可以通過使用Q3檢測碎片離子110、85、68或60來反映三聚氰胺的強(qiáng)度。通過偏最小二乘法可以通過多個(gè)子離子強(qiáng)度計(jì)算母離子強(qiáng)度。實(shí)際上在質(zhì)檢部門,實(shí)驗(yàn)人員只需要選擇85或68這種強(qiáng)度較高的子離子峰來檢測,就足以精確的檢測奶粉中三聚氰胺的含量,靈敏度可高達(dá)50ppb,比GCMS的2ppm高出50倍。
當(dāng)然在實(shí)際使用過程中,往往需要在一份樣品中一次性同時(shí)檢測幾十甚至一千種有害物質(zhì)。這時(shí)可以分別對每一個(gè)項(xiàng)目選擇1~2個(gè)離子對,編輯成表讓QQQ來循環(huán)定量檢測,類似于SIM。在美國FDA的實(shí)驗(yàn)室中,一臺自動進(jìn)樣的三重四極桿質(zhì)譜每晝夜可以測量20~100個(gè)樣品,定量檢測數(shù)萬個(gè)項(xiàng)目。
三重四級桿質(zhì)譜定量分析
三重四級桿通過離子打碎獲得特異性子離子,子離子在通過Q3后時(shí)在接收器上轉(zhuǎn)化為電信號,反映到分析軟件就是離子強(qiáng)度圖。在一定線性范圍下,分析物濃度越高,打到接收器上的離子就越多,信號越強(qiáng),這是定量的基礎(chǔ)。
此外在定量時(shí)可以選擇用峰高或峰面積定量,一般選用峰面積定量準(zhǔn)確。因?yàn)槭嵌?,所以必需?biāo)準(zhǔn)曲線,原理與高效液相類似。一般多用內(nèi)標(biāo)法定量,以排除質(zhì)譜重現(xiàn)性和樣品處理造成的影響。
四極桿對于離子的選擇性通過是交替進(jìn)行的,在所有離子通道之間快速切換。隨著設(shè)置離子對數(shù)量的增加,每個(gè)離子所占用的檢測時(shí)間縮短,這會影響到其檢測靈敏度,但是只要實(shí)際樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液所采用的分析方法一致,定量的準(zhǔn)確性理論上是不受影響的。
三重四級桿環(huán)境條件
環(huán)境要求實(shí)驗(yàn)室溫度為 15~27℃ , 溫度變化<>℃/ h , 相對濕度< 80="">, 質(zhì)譜儀在工作時(shí) ,電路板及分子蝸輪泵會產(chǎn)生大量的熱量 , 要求室溫不大于27℃ 。長期處于高溫下運(yùn)行,會導(dǎo)致電路板損壞及降低泵的使用壽命。儀器需要的氣體有 3 處,分別是霧化氣 ,干燥氣和碰撞氣 。安捷倫三重四級桿質(zhì)譜儀都使用氮?dú)?,w aters 、島津質(zhì)譜儀碰撞氣使用氬氣,霧化氣和干燥器使用氮?dú)?。作為霧化氣和干燥氣的使用的氮?dú)?, 要求純度大于 95.5 % 。
雖然三重四級桿是定量的不二之選,但相對于飛行時(shí)間質(zhì)譜 ,離子阱質(zhì)譜 ,磁質(zhì)譜, 三重四級桿質(zhì)譜靈敏度不高, 主要還是應(yīng)用于與液相色譜聯(lián)用(LC-MS),用作定量分析。將液相色譜高效的在線分離能力與質(zhì)譜的高選擇性 、高靈敏度 的檢測能力相結(jié)合 ,彌補(bǔ)了傳統(tǒng)液相檢測器的不足 ,可以同時(shí)得到化合物的保留時(shí)間、分子量及特征結(jié)構(gòu)碎片等豐富的信息,是組分復(fù)雜樣品和微量/痕量樣品分離分析很有力的研究手段。
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